蛋白表達(dá)
來(lái)源：禾元生物|
發(fā)布時(shí)間：2020-04-29|
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水稻胚乳細(xì)胞生物反應(yīng)器高效重組蛋白表達(dá)平臺(tái)OryzHiExp特點(diǎn)介紹
選擇具有儲(chǔ)藏功能的水稻胚乳細(xì)胞作為生物反應(yīng)器，采用胚乳細(xì)胞特異性表達(dá)的啟動(dòng)子、人工定點(diǎn)突變?cè)鰪?qiáng)啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄水平、蛋白定向儲(chǔ)存、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減負(fù)和密碼子優(yōu)化等綜合技術(shù)，使重組蛋白特異性地在水稻胚乳細(xì)胞中表達(dá)，并定向儲(chǔ)存在蛋白體中，獲得了較高的重組蛋白的表達(dá)，使得重組蛋白產(chǎn)量由mg級(jí)別提高到20g級(jí)別。
項(xiàng)目實(shí)施階段
| 階段 | 具體項(xiàng)目 | 實(shí)驗(yàn)周期 |
| 第一階段 獲取目的基因品系種子 |
基因優(yōu)化合成 | 1個(gè)月 |
| 載體構(gòu)建 | 1個(gè)月 | |
| 愈傷組織誘導(dǎo)/篩選高表達(dá)量植株/表達(dá)量檢測(cè) | 4個(gè)月 | |
| 幼苗移栽與培育/獲得10-20株陽(yáng)性T0代種子 | 6個(gè)月 | |
| 第二階段 獲得可穩(wěn)定遺傳純合子種子 |
T0代種植篩選/獲得陽(yáng)性T1代種子 | 4個(gè)月 |
| 篩選最少5株以上高表達(dá)量的植株品系 | 1個(gè)月 | |
| T1代高表達(dá)純合子種植/篩選純合品系/獲得T2代種子 | 4個(gè)月 | |
| 表達(dá)量與蛋白質(zhì)生物活性分析鑒定 | 1個(gè)月 | |
| 第三階段 純化工藝小試 |
設(shè)計(jì)和開發(fā)符合純度需求的小試純化工藝開發(fā)，獲得mg-g級(jí)的純化小試工藝樣品 | 6個(gè)月 |
可以實(shí)現(xiàn)
1、大分子蛋白，分子量可以覆蓋從100-1000個(gè)氨基酸大??；
2、小分子多肽：分子量小于100個(gè)氨基酸；
3、每kg糙米的目標(biāo)蛋白表達(dá)量在0.1g-10g。
特別適用于：
1、生物制藥，比如疫苗、靶向蛋白/抗體藥、非靶向治療蛋白藥物；
2、工業(yè)生物酶，比如診斷用酶、生物制藥工藝用酶；
3、生命科學(xué)研究工具酶等產(chǎn)品。
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